在操作高效液相色谱仪时,色谱柱是在室温环境下工作的。大多数的工作环境温度是不断变化的，温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,高效液相色谱仪方法中的洗脱方式受温度的影响。高效液相色谱仪等度洗脱时温度会影响保留时间，当温度升高时所有的色谱峰都前移了，等度洗脱时一般温度每升高1C，保留时间会缩短(1~3)%。温度变化对梯度洗脱和等度洗脱的影响趋势是一样的。温度变化...

高效液相色谱仪色谱柱污染会引起保留时间漂移。高效液相色谱仪HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可能是:流动相本身,流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。高效液相色谱仪测试样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分,就可能使保留时间漂移。通常高效液相色谱仪测试样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压...

高效液相色谱仪色谱柱平衡如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑高效液相色谱仪色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常高效液相色谱仪色谱柱平衡需要10~20个柱体积的流动相。但如果在流动相中加入少量添加剂则需要相当长的时间来平衡色谱柱。需要柱子的充分平衡,然后才能对高效液相色谱仪进行检定。流动相有机溶剂高效液相色谱仪分析总要求使用高效液相色谱仪纯的试剂,关键是两点:纯度高、紫外吸收小。纯度高,是希望...

由于高效液相色谱仪HPLC系统中气泡的存在,会造成色谱图.上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。造成上述现象的主要原因有三条:一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡;二是高效液相色谱仪系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净;三是在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现,高效液相色谱仪HPLC...

主要原因可能有液相色谱仪进样阀漏液、加样针不到位或液量不足。针对第一种情况，处理时应对更换液相色谱仪进样阀垫圈；对于第二种情况保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态，以保证进样量的准确。日常工作中，液相色谱仪的保养非常重要，如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液，每次用完液相色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干...

液相色谱仪流动相内产生都无法清除不断产生的气泡，主要是因为液相色谱仪过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在液相色谱仪泵的压力作用下经过滤器进入流动相。解决办法：液相色谱仪过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将液相色谱仪过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次...