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阴离子交换色谱柱洗脱液的选择

发布时间:2022-11-04浏览:509

阴离子交换色谱柱的选择:

离子交换色谱柱通常粗短,直径和长度比一般为110150

阴离子交换色谱柱装柱:

1、色谱柱安装要垂直。

2、装柱时要均匀平整,不能有气泡。


阴离子交换色谱柱洗脱:

1、洗脱液的选择:

1)保证所有组分在洗脱液梯度范围内都是稳定的。

2)要使结合在离子交换剂上的所有组分在洗脱液梯度范围内都能够被洗脱。

3)梯度范围尽量小一些,以提高分辨率。

2、洗脱方式:

离子交换色谱一般采用梯度洗脱,通常有改变离子强度和改变pH值两种洗脱方式。

1)改变离子强度的洗脱:

在洗脱过程中逐步增大离子强度,从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来。

2)改变pH值的洗脱:

阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱,阴离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱。

由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响,一般采用改变离子强度进行洗脱。



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