高效液相色谱仪色谱柱平衡
 
如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑高效液相色谱仪色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常高效液相色谱仪色谱柱平衡需要10~20个柱体积的流动相。但如果在流动相中加入少量添加剂则需要相当长的时间来平衡色谱柱。需要柱子的充分平衡,然后才能对高效液相色谱仪进行检定。 
流动相有机溶剂
 
高效液相色谱仪分析总要求使用高效液相色谱仪纯的试剂,关键是两点:纯度高、紫外吸收小。纯度高,是希望没有杂质干扰高效液相色谱仪HPLC分析;不会有金属离子损害纯度为99.99%以上的高纯度硅胶基质。可以通过重蒸分析纯溶剂;或滤膜过滤,并定期把前珞的过滤头取下，放稀硝酸里清洗,再用纯水洗至中性。
流动相有机溶剂可能影响高效液相色谱仪的检测限。

柱压

柱压过高是高效液相色谱仪分析中常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题。溶剂或样品含有颗粒杂质,这些杂质将筛板堵塞引起压力上升，应更换柱子入口筛板;泵内有空气,解决.的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理;比例阀失效，应更换比例阀;泵密封垫损坏，应更换密封垫;系统检漏，则找出漏点，密封即可。
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