在液相色谱分离条件中，重要的参数就是洗脱条件，其中分离条件又分为等度洗脱和梯度洗脱。

等度洗脱定义：液相色谱操作中，等度洗脱即在样品组分的分析周期中，流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。

梯度洗脱定义：梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。

在色谱分析时，等度洗脱和梯度洗脱各有优点和劣势。

等度洗脱:

优点

对于等度洗脱而言，由于方法运行时，流动相的比例不发生变化，所以它对仪器的要求不高，需要一个单元泵就可以运行方法。

其次，由于等度洗脱条件单一，所以比较容易用来摸索方法设置，例如改变流动相比例，改变柱温等条件。

并且由于等度洗脱每次运行时的流动相比例相同，所以相同方法运行多个样品时，样品之间不需要设置平衡时间来让系统恢复到所需的流动相比例。

缺点

但是它也有缺点，那就是越往后出峰的组分色谱峰越宽。

并且大多数等度洗脱的方法分析时间较长。

梯度洗脱:

优点

而梯度洗脱能够规避掉等度洗脱的问题，峰型得到改，很少拖尾。例如梯度洗脱的样品峰，无论先出峰还是后出峰的组分，它们的峰形基本能保尖锐对称。

其次由于梯度洗脱通常设置的流动相比例是让洗脱强度越来越强，这样能保在较短的时间内，让样品中强保留组分也能被洗脱出来。

缺点

但是伴随着这些优点也会有对应的缺点，先它对仪器的配置要求较高，通常需要配置四元泵或者二元泵。

其次它在每次运行样品之间，需要设置的平衡时间，来让系统中流动相的比例到达初始流动相比例。

之后，由于它的方法设置复杂，例如影响分离的有初始流动相比例、流动相的梯度变化、结束流动相比例、柱温箱温度等，所以方法的开发和优化会较为复杂。而且有时引起基线漂移。

其实只做一两个化合物，是等度洗脱好，速度快，但也并非越快越好，特别在分析生物样品时，考虑到基质效应，保留因子控制在2-3左右较好。梯度洗脱适合分析多个结构不同的物质，如化合物与代谢产物一同鉴定的时候，比如苷和苷元的一同测定。另外很多做合成化学的分析实验室用的也是一通用的梯度洗脱方法，一个方法搞定大部分样品。一般来说对于组成简单的样品可以采用等度洗脱，而对于那些复杂的样品分离通常需要进行梯度洗脱。

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