高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢?

1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?

关于漂移问题：

①温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定；

②流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等；

③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡；

关于快速变化问题

①流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定；

②泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出；

③流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合；

2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?

①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子；

②存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子；

③可能柱超载，减少进样量；

3.HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法

①样品量不足，解决办法为增加样品量；

②样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子；

③样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器；

④检测器衰减太多。调整衰减即可；

⑤检测器时间常数太大，解决办法为降低时间参数；

⑥检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗；

⑦检测池中有气泡。解决办法为排气；

⑧记录仪测压范围不当。调整电压范围即可；

⑨流动相流量不合适。调整流速即可；

⑩检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

4.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?

①泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；

②比例阀失效，更换比例阀即可；

③泵密封垫损坏，更换密封垫即可；

④溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；

⑤系统检漏，找出漏点，密封即可；

⑥梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

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